Virus de fiebre porcina clásica kit ELISA rehegua .

Especificación rehegua art .

 

 

Procedimientos & Interpretación de Prueba rehegua .

 

Paso 1 Procedimiento de prueba rehegua .

1.1 Ojejohéi hagua solución ñembosako i .

WConcentración de Orkingos rehegua . wLíquido de ceniza: .Ojepuru mboyve, pe solución de lavado oñemoĩ jeyva’erã temperatura ambiente-pe (20-25 grado ) ha oñemboveve peteĩchaite ojejapo haĝua chugui uniforme. Upéi ojedilui 20 jey pe solución de lavado concentrado y purificada reheve (techapyráramo, oñembojehe a 5ml solución de lavado concentrado 95ml y purificado rehe), oñembojehe a porá, ha pe líquido de lavado diluido ikatu oñeñongatu 2-8 grado-pe 7 ára pukukue.

1.2 Ñembosako’i muestra rehegua .

1 Mymba ruguy entero ojegueraha, oñecentrifugákuri 4000rpm-pe 10 minuto aja, ha oñembyaty sobrenadante. Suero ikatu avei oñecoagula naturalmente hemólisis ÿre.

2 Jadilui pe suero oñeha ava era 10 jey pe placa de dilución séricape (techapyráramo:ñamoí 15UL suero rehegua oñeha ava era diluyente de muestra 135UL-pe).

NOTA: Natekotevẽi ojedilui umi control negativo ha positivo.

1.3 Procedimiento de prueba rehegua .

1Ejagarra pe microplaca etiqueta enzima rehegua (según mboy muestra, ikatu ojedesmonta ha ojeporu heta jey), oñembojehe a 100ul suero diluido microplaca etiqueta enzima rehe, emohenda mokõi ykua petettet control negativo ha control positivo rehegua, ha emoinge 100ul pe reacción ykua rehe respectivamente. Oñemboty mbeguekatu pe muestra pe ykuápe, ojeporúvo pe película de placa de sellado ojejaho’i haĝua pe chapa, ha oñeincuba 37 grado-pe 30 minuto aja.

2 Jaipe a pe película chapa de sellado rehegua, ñamombo pe solución pe chapa ykuape, ñamoí 300μl concentración de lavado de la colocación de trabajo petettet ykuápe, ha upéi ñamombo pe líquido pe ykuápe. Jajapo jey umi paso oje e va ekue 5 jey, ha ipahápe jajapi peteĩ kuatia absorbente ipotĩva ári.

3Amoĩ 100μl enzima oñeconjugáva peteĩteĩ ykuápe, ojejaho’i pe chapa ha oñeincuba 37 grado-pe 30 minuto aja.

4Aipe a pe película de chapa de sellado, ñamombo pe solución pe chapa ykuape, ñamoí 300μl concentración de lavado de la colocación de trabajo petettet ykuápe, ha upéi ñamombo pe líquido pe ykuápe. Jajapo jey umi paso oje e va ekue 5 jey, ha ipahápe jajapi peteĩ kuatia absorbente ipotĩva ári.

5 Ñamoí 100μl solución sustrato rehegua petettet ykuápe, ñamoí pe chapa ha ñaincuba 10 minuto 37 grados mombyry tesapegui.

1 Ñamoĩ 50μl Solución de parada peteĩteĩ ykuápe, ha jaikuaa mba éichapa osẽ 5 minuto ryepýpe.

 

Paso 2 Resultado interpretación rehegua .

Ojelee pe valor OD450 peteîteî ykua rehegua pe lector microplaca 96 pozo rehegua.

2.1 Ñemoañete .

Pe valor promedio OD450Nm control negativo rehegua ha’e < 0,2 ha pe valor promedio OD450NM control positivo rehegua tuichave térã ojoja 0,7-gui, umi resultado experimental ovale. Ndaupeichairamo, ojejapo jeyva’erã pe prueba.

2.2 Método de cálculo rehegua .

Káda muestrape guará, ojekalkula s/ p kóicha ojeporúvo umi valor muestra ha control oñemyatyrõva:

2.3 Resultado rehegua art .24 .

S/P < 0.2 jave, ojehusga negativo ramo.

S/P > 0.3 jave, ojehusga positivo ramo.

0,2 mbovyve térã ojoja S/P mbovyvéva térã ojoja jave 0,3 rehe, ojehusga sospechoso ramo, ha oñesugerí ojejapo jey haguã muestreo ha prueba peteĩ arapokõindy rire.

 

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